AIB1蛋白双单克隆抗体夹心ELISA检测法的建立及初步应用
Estabilishment of double-antibody sandwich ELISA to detect AIB1 protein and preliminary application
作者：庞秋霞;屈艺;魏大鹏;赵菊梅;张海莲;成延萍;许静洪;
Author：
收稿日期： 年卷（期）页码：2010,25(06):-709-711
期刊名称：华西药学杂志
Journal Name：WEST CHINA JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES
关键字：AIB1基因;酶联免疫吸附法;构建;检测
Key words：
基金项目：陕西省教育厅专项科研计划项目(编号:08JK500);;
陕西省延安市科学技术研究发展计划项目(编号:2008ks-31)资助
中文摘要
目的建立双单克隆抗体夹心ELISA方法检测血清中AIB1的水平,探讨其在AIB1蛋白检测中的应用价值。方法应用抗AIB1-C单克隆抗体4B9F12作为固相抗体,Biotin-1A2E1作为标记抗体,ELISA双抗体夹心法检测AIB1。构建及优化的内容包括:最适包被浓度、最适包被缓冲液、生物素标记抗体工作的浓度;鉴定的指标包括:敏感性、特异性、稳定性等。结果使用0.05 mo.lL-1碳酸盐缓冲液(pH9.6)为包被缓冲液,包被抗体4B9F12工作浓度为10μg.mL-1,Biotin-1A2E1工作浓度选择1:500;采用双抗体夹心法检测外周血中AIB1的特异性和敏感性均较高。结论抗AIB1双抗体夹心ELISA方案的构建、鉴定达到了预期目的 ,为临床研究奠定了基础。
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