甘草酸单克隆抗体的制备与ELISA方法的建立
Preparation of monoclonal antibodies against glycyrrhizic acid and development of ELISA for glycyrrhizinic acid detection
作者：宋孚洋;郝秀静;张东涛;马臣杰;彭励;丁晓莉;
Author：
收稿日期： 年卷（期）页码：2016,31(04):-382-385
期刊名称：华西药学杂志
Journal Name：WEST CHINA JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES
关键字：甘草酸;单克隆抗体;甘草酸免疫抗原;甘草酸包被抗原;酶联免疫法;活性酯法;甘草
Key words：
基金项目：国家自然科学基金资助项目(批准号:31260036);;
宁夏自治区科技攻关项目(2013);;
宁夏大学科学研究基金资助(2012)
中文摘要
目的制备特异性的甘草酸单克隆抗体。方法通过活性酯法分别制备了甘草酸免疫抗原GA-KLH和包被抗原GA-OVA;用免疫抗原免疫Balb/c小鼠,采用间接竞争ELISA法筛选后,成功获得了能稳定分泌甘草酸单克隆抗体的杂交细胞株3D6;用阳性细胞株刺激小鼠,获得了高效价的、特异性很高的甘草酸单克隆抗体。结果经检测与甘草酸主要结构类似物甘草次酸的交叉反应率低于0.5%,与熊果酸、齐墩果酸等甘草酸结构类似物无交叉反应;将该方法应用于甘草样品实测,采用HPCL法验证,结果表明:所采用的ELISA分析方法测定的数据与HPLC分析方法有很好的相关性(r~2=0.9977)。结论为甘草酸ELISA快速检测试剂盒的开发奠定了良好的基础。
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