抗delta-like-1单克隆抗体的制备与鉴定

Preparation and identification of a monoclonal antibody against delta-like-1

作者：张小洪;魏大鹏;李天佳;罗志娟;

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收稿日期：          年卷（期）页码：2010,25(06):-712-714

期刊名称：华西药学杂志

Journal Name：WEST CHINA JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES

关键字：Delta-like-1;单克隆抗体;U251细胞株;酶联免疫吸附法

Key words：

基金项目：

中文摘要

目的制备抗delta-like-1的单克隆抗体并鉴定其特异性。方法用delta-like-1多肽-BSA蛋白复合物作为免疫原免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗delta-like-1单抗的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western blot、细胞免疫组化对此抗体特性进行鉴定。结果筛选到两株能稳定分泌抗delta-like-1单抗的细胞株3H11C11A9E3和2D5D11F8F1,亚类鉴定两株均为IgG1,轻链为kappa链;ELISA法测定两株细胞腹水抗体效价分别为1:4.096×105和1:1.024×105,抗体亲和常数分别为3.98×107、3.28×107L.mol-1;Western blot显示此单抗能特异性识别神经胶质瘤细胞株U251中的天然delta-like-1蛋白;细胞免疫组化进一步显示delta-like-1分布于细胞核中。结论成功制备了抗delta-like-1单克隆抗体,可为研究delta-like-1与脑胶质瘤等神经系统疾病的关系奠定基础。

参考文献

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