可溶性固定化木瓜蛋白酶的制备及性质研究
Preparation and properties of soluble immobilized papain
作者:李灵玲;张涛;余蓉;
Author:
收稿日期: 年卷(期)页码:2007,(02):-177-179
期刊名称:华西药学杂志
Journal Name:WEST CHINA JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES
关键字:可溶性固定化酶;木瓜蛋白酶;酶学性质;偶联
Key words:
基金项目:
中文摘要
目的制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶(PP)并研究其部分酶学性质。方法将PP偶联在羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上,制备得到水溶性固定化PP,并测定游离和水溶性固定化PP最适作用pH、最适作用温度、Km值、热稳定性、酸碱稳定性、低温稳定性和回收稳定性。结果最适作用pH分别为6.0、5.0,最适作用温度分别为60℃、70℃,Km值分别为2.53、3.07 mg.m l-1;可溶性固定化PP在60℃条件下,保温12 h,仍有62%的活性;在4℃条件下,30 d后活性保留达90%以上;在pH6时稳定性最好,pH4-7范围内也较稳定(相对活性>80%)。结论可溶性固定化PP能够在大于pH5.5的溶液中完全溶解,最适作用pH范围变窄,最适作用温度和Km值升高;热和酸碱的稳定性均明显增强。
参考文献
[1]王海英,林洪,叶眉,等.固定化木瓜蛋白酶的研究及其应用[J].青岛海洋大学学报,2001,31(5):689-694.
[2]魏荣卿,沈斌,刘晓宁,等.壳聚糖载体柔性固定化木瓜蛋白酶[J].过程工程学报,2005,5(2):183-187.
[3]周慧,鲁治斌,齐杰,等.蛋白水解酶活力测定新方法[J].生物化学杂志,1994,10(5):630-632.
[4]蒋中华,张津辉.生物分子固定化技术及应用[M].北京:化学工业出版社,1998.44-49.
[5]曹黎明,陈欢林.酶的定向固定化方法及其对酶生物活性的影响[J].中国生物工程杂志,2003,23(1):22-29.
【关闭】