Hochest染料-荧光分光光度法测定基因治疗非病毒载体中DNA的含量

Determination of DNA in nonviral vectors for gene therapy by Fluorospectrophotometry

作者：孙逊,王印,乔小蓉,张志荣

Author：

收稿日期：          年卷（期）页码：2003,(06):-412-415

期刊名称：华西药学杂志

Journal Name：WEST CHINA JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES

关键字：荧光染料Hoechst33258;载基因纳米粒;载基因脂质体;DNA含量测定

Key words：

基金项目：国家高技术研究发展计划 ( 863计划 )资助项目 (批准号 :2 0 0 1AA2 180 2 1)

中文摘要

目的　利用荧光染料Hoechst 332 5 8与DNA结合后 ,荧光强度显著增强的特点 ,建立了基因治疗非病毒载体中DNA的含量测定方法。方法　对Hoechst 332 5 8-DNA溶液进行荧光扫描 ,并建立了标准曲线。分别测定了纳米粒胶体溶液超速冷冻离心后的上清液和用酶消化后的脂质体提取液中DNA的含量。结果　Hoechst332 5 8-DNA溶液的最佳激发波长为 35 3.6nm ,最佳发射波长为 4 5 4 .4nm ,标准曲线的线性范围为 0 .2～ 1.0 μg·ml-1。测得包载DNA纳米粒的平均包封率为 75 .1%± 8.6 %(n =5 ) ,DNA阳离子脂质体的平均抗核酸酶能力为 84 .9%± 7.8% (n =5 )。结论　荧光染料Hoechst332 5 8可用于测定基因治疗非病毒载体中DNA的含量 ,所建立的荧光分光光度法为载基因纳米粒、脂质体制备工艺和质量标准的建立提供了依据。

参考文献

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