一种新型肌酸激酶检测方法的研究
Study on a novel determination for creatine kinase in urine
作者:刘贺,李宇茜,李星影,王睿,杨雨玫,徐小平
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收稿日期: 年卷(期)页码:2020,35(06):-626-629
期刊名称:华西药学杂志
Journal Name:WEST CHINA JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES
关键字:肌酸激酶活性;肌酸;检测机理;个体差异;高效液相色谱法;比色法;酶偶联法;快检法;大鼠
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中文摘要
目的根据肌酸激酶(CK)的检测原理,以肌酸为对象,快速检测CK的活性。方法根据CK可催化磷酸肌酸和二磷酸腺苷(ADP)产生等摩尔肌酸和三磷酸腺苷(ATP)的机理,通过肌酸与碱性甲萘酚和丁二酮作用显色(525 nm),用比色法测定尿肌酸的含量。经HPLC(验证集)的验证和经典酶偶联法(校正集)的校正,由MedCal统计软件计算尿肌酸含量与尿ATP含量的关联性,以此说明肌酸值对CK的活性表达。结果 1.287~51.47μg·mL~(-1)肌酸与峰面积的线性关系良好,回归方程为:Y=0.023X-0.0288(r~2=0.9992),检测限为0.4290μg·mL~(-1),平均加样回收率为100.3%,平均日内和日间精密度的RSD分别为2.22%、8.63%。尿肌酸的测定结果与验证集比较,具有良好的相关性;与校正集比较,具有较好的相关性。SD大鼠在高强度运动后,其尿肌酸的水平发生明显变化,48 h达峰,具有性别差异。其中,雄鼠达峰后下降缓慢,而雌鼠出现快速下降趋势。结论尿肌酸与尿ATP的含量均能反映CK活性,且检测步骤更简捷、成本更低,可成为快速检测CK的较好方法。
参考文献
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