三七粗多糖的分离纯化及其对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响

Isolation and purification of Panax notoginseng polysaccharide and its effect on proliferation of human periodontal ligament stem cells and mice osteoblasts in vitro

作者：李怀宇;钟媛媛;李双;孙孔春;张晓红;姚艳云;刘艳红;侯世祥;陈彤;

Author：

收稿日期：          年卷（期）页码：2019,34(05):-433-439

期刊名称：华西药学杂志

Journal Name：WEST CHINA JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES

关键字：三七多糖;DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂;分离纯化;人牙周膜干细胞;小鼠成骨细胞MC3T3-E1;体外增殖活性;MTT法;碱性磷酸酶;骨钙素

Key words：

基金项目：国家自然科学基金资助项目(批准号:8176140266);; 云南省教育厅科学研究基金项目(No.2018JS708);; 云南省科学技术厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项面上项目(No.2019FB021)

中文摘要

目的从工业三七药渣中提取、分离及纯化三七多糖,测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分的含量、分子量和p H,并考察其对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响。方法以提取过三七总皂苷的工业三七药渣为原料,采用水提醇沉法得到三七粗多糖,通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖;采用蒽酮-硫酸法测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分的含量,用高效凝胶渗透色谱法测定其分子量;采用MTT法测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响。结果水提醇沉法得到三七粗多糖的含量为69. 7%,得率2. 43%;通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖,得到水洗脱部分PNPSⅠ及Na Cl溶液梯度洗脱部分PNPSⅡ～Ⅴ;三七粗多糖、PNPSⅠ～Ⅴ重均分子量分别为38. 59、32. 00、96. 98、148. 60、154. 40、113. 60 k Da;在一定浓度范围内,三七粗多糖、PNPSⅠ～Ⅱ能促进人牙周膜干细胞的生长,PNPSⅢ～Ⅳ能抑制其生长;三七粗多糖、PNPSⅠ～Ⅳ具促进小鼠成骨细胞生长的作用。结论通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖,得到1种中性多糖和4种酸性多糖;三七粗多糖、PNPSⅠ～Ⅱ能促进人牙周膜干细胞的体外增殖,三七粗多糖、PNPSⅠ～Ⅳ具促进小鼠成骨细胞生长的作用。

英文摘要

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